Revista de Medicina Estética - Nº 50 > Regeneración, rejuvenecimiento de tejidos y optimización de la cicatrización a través de factores de crecimiento y céllulas madre autólogas

Sumario Nº 50 > Medicina Antienvejecimiento

Regeneración, rejuvenecimiento de tejidos y optimización de la cicatrización a través de factores de crecimiento y células madre autólogas

Dr. Edgardo Amílcar Celi (Hematología - Regeneración de tejidos)
La Plata - Argentina
E-mail: ito@netverk.com.ar
Revista SEMAL Nº9

Dr. Edgardo Amílcar Celi

E-mail: ito@netverk.com.ar

El objetivo del presente trabajo es regenerar (1) y/o mejorar los tejidos y las cicatrizaciones en cirugías o por consultorio externo a través de procedimientos autólogos. Para lograr estos objetivos se usan en forma sistemática factores de crecimiento plaquetarios (2), células madre (3) y los productos residuales a partir de la producción de los mismos (4).

La función normal de los tejidos requiere que el índice de la pérdida celular - apoptosis (5,6) - sea correspondido por el índice de su renovación. El envejecimiento de un individuo se produce por la disminución de la reparación o la aceleración de la pérdida celular de los tejidos de los órganos (envejecimiento celular). El conocimiento de este mecanismo de envejecimiento celular nos hizo plantear dos preguntas:

1. ¿Cuál es el reloj celular que mide el tiempo de la senectud replicativa celular?
2. ¿Cuál es el lazo entre la senectud de la célula y el envejecimiento del organismo?

Dado el agotamiento celular continuo, que sucede en el tiempo, cuando la pérdida excede la reparación, lo que sobreviene conduce eventualmente a una declinación en la función y, en última instancia, a la falla del órgano. Cuando está restringido a órganos específicos, puede dar lugar a una de las muchas enfermedades degenerativas crónicas tales como cirrosis del hígado.

Actualmente, se sabe que en este envejecimiento está implicada la telomerasa (7) (disminución de la misma) con pérdida parcial del extremo telomérico que hace que cada célula tenga una cantidad máxima de mitosis (aproximadamente 50 para los fibroblastos).

Podemos alterar, al menos en parte, el curso de este envejecimiento con el uso de células madre autólogas y factores de crecimiento plaquetarios para lograr mejoramiento de los tejidos e incluso beneficiar la cicatrización de los mismos.

Los factores de crecimiento (Tabla 1) se encuentran englobados en las moléculas de bajo peso molecular que reciben el nombre genérico de citoquinas (Tabla 2). Estas son moléculas solubles que trasmiten información entre células. Son secretadas por las células de origen en respuesta a señales específicas e influyen en la respuesta y función de las células blanco.

Tabla 1. Principales Factores de Crecimiento

  PDGF : Factor de Crecimiento Derivado de Plaquetas
  TGF-b : Factor de Crecimiento Transformante beta
  EGF : Factor de Crecimiento Epidérmico
  VEGF : Factor de Crecimiento Vascular Endotelial
  IGF-I : Factor de Crecimiento Insulínico tipo I
  bFGF : Factor de Crecimiento Fibroblástico básico

Tabla 2. Clasificación de las citoquinas

  Interleuquinas (IL): 1 - 15
  Interferones (IF): alfa, beta, gamma
  Factor de necrosis tumoral (TNF) alfa y beta
  Factores estimulantes de colonias (CSF)
  Factores de crecimiento Transformante (TGF)
  Otros factores de crecimiento (PDGF)

Una célula madre o stem cell (8) es una célula que tiene la capacidad de dividirse (auto replicarse) por períodos indefinidos de tiempo a través de la vida del organismo. Bajo condiciones apropiadas, o dadas las señales correctas, las stem cells pueden diferenciarse hacia los diversos tipos de células que forman el organismo (9). Según su potencialidad se clasifican en: totipotente (generan células embrionarias (embriones), pluripotente (generan todos los tipos celulares del embrión), multipotente (generan órganos con sus tipos celulares), oligopotente (generan tejidos específicos de un órgano) y unipotente (generan un solo tipo de célula madura). Debido a la capacidad de remedar o tomar las funciones del tejido a reparar se dice que tienen plasticidad (10). La plasticidad es la capacidad de una stem cell adulta de tomar la función del tejido a reparar. (Las hemopoyéticas se usan a nivel experimental para resolver patologías de cualquier tipo de tejido). Por ejemplo, tejido vascular (11), adiposo (12), hepático (13), etc.

Otras de las stem cells usadas para reparación o regeneración de tejidos son las SC mesenquimáticas (14) (MSC - son una proporción importante de las SC de la médula ósea). Las MSC representan una opción terapéutica atractiva ya que pueden aislarse con relativa facilidad. Se está explorando la capacidad de las MSC para regenerar tejidos que el organismo no puede reparar o lo hace muy lentamente. Las MSC no sólo iniciarían la regeneración tisular, sino que podrían contribuir a la movilización de otras SC hacia el sitio de reparación. Se suele realizar una siembra directa en el sitio dañado para atenuar o corregir desórdenes del tejido.

Uno de los conceptos más modernos de las residencias de las SC es el de "Nicho". Las stem cells junto con las células del micro entorno que las rodean forman el nicho (15, 16) de las SC. Se puede definir funcionalmente como la "unidad multicelular y estructural dinámica" que balancee las decisiones de auto-renovación y destino de las stem cells.

Las stem cells hematopoyéticas (HSCs) residen en los lugares localizados en el hueso trabecular donde entran en contacto con los osteoblastos. Las digestivas (17) se asocian para precisar localizaciones dentro de las subestructuras discretas (ej. unidades gástricas o criptas intestinales). Las epidérmicas (18) con el potencial de llenar de queratinocitos basales, el pelo y las glándulas sebáceas se encuentran en la ampolla del folículo piloso.

Del estudio de los nichos se desprende que de acuerdo a la capacidad de dividirse y actuar hay tres tipos de stem cells (19):

"Long term SC" - LTSC - (son las células de reservorio por excelencia).
"Short term SC" - STSC - (son las que actúan como reparadoras o regeneradoras de los tejidos -se calcula que se dividen aproximadamente durante dos meses antes de desaparecer-).
"Multi Potent Progenitor" - MPP - (son la última fase de las stem cells, ya con las características del tejido blanco -alta tasa de mitosis y corta sobrevida).

Una manera de "medir" la cantidad, o sea, la posible funcionalidad de las stem cells de médula ósea es por el recuento de las mismas en sangre periférica. Se realiza a través del antígeno CD34. El mismo nos da pautas indirectas de la posibilidad de que las células hemopoyéticas reactiven los tejidos a tratar. El recuento mínimo funcional es 0.04% de los leucocitos circulantes.

Es importante precisar que la población CD34+ representa el 1% al 6% de la médula, mientras que el subconjunto de HCS representa el solamente cerca de 0.05%. Así, la población CD34+ incluye, además de HCS, células no HCS (por ejemplo stem cells mesenquimáticas).

Obtención de Factores de crecimiento
Las técnicas para la obtención de plasma rico en factores de crecimiento siguen las pautas del Dr. Anitua con respecto a la obtención de la muestra y los tiempos de centrifugación (aprox. 10´ a 500 x g. para una centrífuga de mesa). La diferencia es que no realizamos la activación plaquetaria con Cl2Ca al 10% ya que tratamos a los tejidos blandos con heridas quirúrgicas y en los cuales la cascada de la coagulación se encuentra activada.

Obtención de Stem cells
Se obtienen 15 a 20 cc. de médula ósea (en 2 a 3 punciones esternales). No se aspira más de 7 cc. por cada punción. Se centrifuga 20´ a 250 x g. Se extraen las stem cells de la zona del Buffy Coat, incluída la zona de neocitos. El resto se descarta. (Fig. 1). Seguidamente, se lleva a cabo la separación de stem cells y células mononucleares por gradiente de densidad (Ficoll Hypaque) (Fig. 2). Una vez obtenidas las stem cells se resuspenden en el plasma rico en factores de crecimiento aplicándose del mismo modo que los factores de crecimiento solos.


Figura 1	Figura 2

Los Factores de crecimiento se aplican en piel (cara, escote y cuello, manos, etc.) (20), zonas de sutura, estrías, cicatrices, cavidades virtuales (lifting) y úlceras (miembros inferiores). Los Factores de Crecimiento + stem cells se aplican en cuero cabelludo, lipotransferencias (21), revascularización MI y cardiaca.

En relación a la optimización y sistematización de diferentes técnicas en uso para rejuvenecimiento, actualmente estamos realizando estudios prospectivos con:

1. Láser solo y combinado con factores de crecimiento y/o células madre,
2. Factores de crecimiento + activación de monolitos,
3. Recuperación de stem cells del tejido adiposo de las lipoaspiraciones.

BIBLIOGRAFÍA

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Uso de factores de crecimiento y células madre en autoinjerto de grasa. Dr. Abel Chajchir, Dr. Gustavo Chajchir, Dr. Edgardo Celi y Dr. Marcelo Gómez Barreto. Revista Argentina de Cirugía Plástica, Volumen XII, Número 2, 2005.





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